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上海信帆給你解讀:艾滋病的ELISA分析

更新時(shí)間:2013-12-13      瀏覽次數(shù):1198

ELISA測(cè)定方法是以抗原和抗體分子為測(cè)定靶標(biāo)的方法,亦是目前zui為常用的實(shí)驗(yàn)室診斷方法之一。

  從理論上說,一種生物或生理活性物質(zhì),只要有辦法得到其特異的抗體,就可以建立這種物質(zhì)的酶聯(lián)免疫測(cè)定方法。在以前看來一些難以進(jìn)行質(zhì)量測(cè)定的微量生物活性物質(zhì),如受體、細(xì)胞因子以及酶等均可使用酶聯(lián)免疫測(cè)定技術(shù)來測(cè)定。酶聯(lián)免疫測(cè)定方法是以抗原抗體間的特異反應(yīng)為基礎(chǔ)的,其與生化的化學(xué)反應(yīng)有著本質(zhì)的區(qū)別,并且由于標(biāo)記物如同位素、酶、熒光素、微量元素、發(fā)光物質(zhì)等的摻人,酶聯(lián)免疫測(cè)定技術(shù)從低靈敏的免疫沉淀和免疫凝集反應(yīng)進(jìn)入到了高靈敏的放射免疫、酶免疫、熒光免疫和發(fā)光免疫測(cè)定時(shí)代,可見酶聯(lián)免疫測(cè)定更多的是用于生物活性物質(zhì)的微量測(cè)定。

  目前在上,很多重要的疾病診斷標(biāo)志物均使用酶聯(lián)免疫測(cè)定方法來檢測(cè),如抗HAVIgM,乙肝“兩對(duì)半”、抗HCV,抗HIV,梅毒抗體、優(yōu)生優(yōu)育TORCH系列、性病病原體的抗原或抗體等傳染性病原體血清標(biāo)志物、激素、腫瘤標(biāo)志物、自身抗體、特種蛋白、細(xì)胞因子和治療藥物以及HBVDNA,HCV-RNA,遺傳病基因、腫瘤基因、基因突變等,這些標(biāo)志物的檢測(cè)質(zhì)量直接關(guān)系到患者的診斷和治療。

  而在血站,HBsAg,抗HCV,抗HIV和梅毒抗體等標(biāo)志物的檢測(cè),哪怕是1%的錯(cuò)誤,對(duì)將要接受輸血的特定患者來說,就是100%的災(zāi)難。近期,在電視、報(bào)紙等新聞媒體中,??梢姷揭恍┯嘘P(guān)醫(yī)患糾紛的報(bào)道,其中一些就與酶聯(lián)免疫測(cè)定有關(guān),如輸血后丙肝病毒、艾滋病毒感染的發(fā)生,性病檢測(cè)的假陽性等。可見,酶聯(lián)免疫測(cè)定的質(zhì)量控制有多么重要。

  酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法-ELISA的應(yīng)用

  ELISA應(yīng)用的范圍很廣,而且正在不斷地?cái)U(kuò)大,原則上ELISA可用于檢測(cè)一切抗原、抗體及半抗原,可以直接定量測(cè)定體液中的可溶性抗原。酶免疫試驗(yàn)(EIA)結(jié)合光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡可進(jìn)行抗原定位與結(jié)構(gòu)的研究,用酶標(biāo)記抗原或抗體結(jié)合免疫擴(kuò)散及免疫電泳可提高試驗(yàn)的敏感性。在實(shí)際應(yīng)用方面可作疾病的研究診斷、疾病監(jiān)察、疾病普查、法醫(yī)檢查、獸醫(yī)及農(nóng)業(yè)上的植物病害的診斷檢定等。因此,它和生物化學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、藥理學(xué)、流行病學(xué)及傳染病學(xué)等方面密切相關(guān)。檢查抗原和半抗原方面:在內(nèi)分泌方面已經(jīng)用于檢測(cè)雌性激素、絨毛膜促性腺激素、黃體素、胰島素、皮質(zhì)醇、促甲狀腺素和孕酮等,其敏感性與RIA相當(dāng),在血液學(xué)方面可用于檢查凝固因子(如第Ⅷ凝固因子)、紅細(xì)胞抗原及結(jié)合球蛋白(HaptoGlobin)等,在腫瘤方面已試用檢查甲胎蛋白(AFP)癌胚抗原(CEA),對(duì)前者的敏感性已達(dá)到與放射免疫試驗(yàn)相當(dāng)?shù)乃?,但?duì)CEA檢查的敏感性較低,目前尚不能用于常規(guī)診斷,在傳染病的診斷方面正在日益擴(kuò)大,其中zui滿意的是用于檢查乙型肝炎表面抗原。國(guó)內(nèi)外已有ELISA檢測(cè)的商品供應(yīng)。尚有用于檢查霍亂弧菌、大腸肝菌、綠膿桿菌和破傷風(fēng)梭菌毒素;腦膜炎球菌及淋球菌抗原;檢查免疫抑制樣本中常見的白色念殊菌抗原,檢查樣本或病獸的糞便中的輪狀病毒,自樣本標(biāo)本中檢查甲肝病毒、皰疹病毒、麻疹病毒、流感、呼吸道融合及巨細(xì)胞病毒等。還可用于植物組織漿液中檢查植物病毒。此外尚試用于測(cè)鉤體抗原及血吸蟲病的循環(huán)抗原等。在免疫化學(xué)方面可用于檢測(cè)白蛋白,免疫球蛋白的各種組份,也可用于檢測(cè)補(bǔ)體成份,如:ciq,還能用于檢測(cè)蛇毒。

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