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α-羥丁酸脫氫酶(HBDH)實(shí)驗(yàn)的檢驗(yàn)原理

更新時(shí)間:2024-09-27      瀏覽次數(shù):484

α-羥丁酸脫氫酶(HBDH)實(shí)驗(yàn)的檢驗(yàn)原理

 

產(chǎn)品名稱:α-羥丁酸脫氫酶(HBDH)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)

英文名稱:HBDH

反應(yīng)方法:IFCC(速率法)

樣本類型:血清

 

背景介紹:

α-羥丁酸脫氫酶(HBDH)是一種酶,存在于人體各組織中,以心肌組織含量最多,約為肝臟的2倍,其活性達(dá)總酶活力的一半以上。它不是一個(gè)獨(dú)立的特異酶,而是乳酸脫氫酶(LDH)的一種同工酶,能催化α-羥丁酸氧化為α-酮丁酸。當(dāng)心肌受損時(shí),α-羥丁酸脫氫酶就會(huì)釋放到血中,所以血清α-羥丁酸脫氫酶在發(fā)生心肌疾病時(shí)明顯增高。

 

檢驗(yàn)原理:

主要基于酶促反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)原理。在速率法中,通過(guò)連續(xù)監(jiān)測(cè)反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)物或底物的濃度變化,可以計(jì)算出酶促反應(yīng)的速率,從而確定酶的活性。

對(duì)于α-羥丁酸脫氫酶(HBDH)的速率法檢測(cè),通常使用α-酮丁酸作為底物,在適當(dāng)?shù)?/span>pH和溫度下,HBDH催化α-酮丁酸還原為α-羥丁酸,同時(shí)伴隨著NADH(還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸)的生成。反應(yīng)過(guò)程中,通過(guò)監(jiān)測(cè)NADH的生成速率,可以間接推算出HBDH的活性。

 

樣品收集、處理及保存方法

1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離10分鐘取上清。

5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

送樣須知:

1.南京和上海地區(qū)的客戶可提供上門取樣服務(wù),提前一天聯(lián)系

2.外地客戶可郵寄樣本,樣本運(yùn)輸應(yīng)符合一般的生物學(xué)要求,密封加冰袋或者干冰運(yùn)輸

3.若細(xì)胞、血清、組織樣本具有潛在的傳染性或致病性,請(qǐng)務(wù)必提前告知

4.測(cè)試結(jié)束提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告后,樣本可以保留1個(gè)月,若需保留樣本或者回收樣本請(qǐng)?zhí)崆案嬷?/span>


備注:本公司對(duì)客戶的項(xiàng)目的專有技術(shù)和資料(包括實(shí)驗(yàn)方案,測(cè)試結(jié)果,樣本等)負(fù)有保密的責(zé)任。

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