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elisa檢測(cè)服務(wù)對(duì)標(biāo)本的要求

更新時(shí)間：2018-09-27      瀏覽次數(shù)：1411
 　　elisa檢測(cè)服務(wù)對(duì)標(biāo)本的要求
　　1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
　　2．不能檢測(cè)含nan3的樣品，因nan3抑制辣根過氧化物酶的（hrp）活性。
　　人蓖麻毒素（ricin）elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟
　　1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽性對(duì)照2孔、空白對(duì)照1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
　　2.加樣：分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照50µl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40µl，然后再加待測(cè)樣品10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，
　　3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
　　4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
　　5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
　　6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50µl，空白孔除外。
　　7.溫育：操作同3。
　　8.洗滌：操作同5。
　　9.顯色：每孔先加入顯色劑a50µl，再加入顯色劑b50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
　　10.終止：每孔加終止液50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
　　11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（od值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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