6-磷酸葡萄糖脫氫酶試劑盒太棒了！

測(cè)定意義：
G6PDH（EC 1.1.1.49）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是磷酸戊糖途徑的關(guān)
鍵酶，催化 6-磷酸葡萄糖氧化為 6 -磷酸葡萄糖酸內(nèi)酯，同時(shí)將NADP+還原為NADPH，供
生物合成及維持細(xì)胞內(nèi)的還原狀態(tài)用。因此6-磷酸葡萄糖脫氫酶活性的高低可以從一定程
度上反映出生物體的生物合成和抗氧化能力。
 

測(cè)定原理：
G6PDH 催化NADP+還原生成NADPH，在340 nm 下測(cè)定NADPH 增加速率。
 

需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸
餾水。
 

試劑的組成和配制：
提取液：60mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體47.5 mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1 支，-20℃保存；
試劑三：粉劑×1 支，-20℃保存；

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測(cè)定步驟：
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm，蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑二和試劑三轉(zhuǎn)移至試劑一中充分溶解；在37℃（哺乳動(dòng)物）或25℃（其它物種）
水浴10min 以上；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
3、 在1mL 石英比色皿中加入50μL 樣本和950μL 試劑一，混勻后立即記錄340nm 處1min
后吸光值A(chǔ)1 和 6min 后的吸光值A(chǔ)2，計(jì)算ΔA=A2-A1。
 

注意：若ΔA 大于0.5，需將酶液用提取液稀釋?zhuān)?jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)?；?qū)⒎磻?yīng)
時(shí)間縮短至2min，使A2-A1 小于0.5，可提高檢測(cè)靈敏度。

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